Тест гемоглобина сыворотки свободный
Сывороточный свободный гемоглобин-это анализ крови, который измеряет уровень свободного гемоглобина в жидкой части крови (сыворотке). Свободный гемоглобин-это гемоглобин вне эритроцитов. Большая часть гемоглобина находится внутри эритроцитов, а не в сыворотке крови. Гемоглобин переносит кислород в кровь.
Как выполняется тест
Необходим образец крови.
Как подготовиться к тесту
Никакой подготовки не требуется.
Как тест будет чувствовать себя
Когда игла вводится для забора крови, Некоторые люди чувствуют умеренную боль. Другие чувствуют только укол или жжение. После этого может появиться некоторое пульсирование или небольшой ушиб. Это скоро пройдет.
Почему проводится тест
Гемоглобин (Hb) является главным компонентом эритроцитов. Это белок, который несет кислород. Этот тест делается для диагностики или мониторинга того, насколько тяжелой является гемолитическая анемия. Это расстройство, при котором низкий уровень эритроцитов вызван аномальным распадом эритроцитов.
нормальный результат
Плазма или сыворотка крови у кого-то, кто не имеет гемолитической анемии, может содержать до 5 миллиграммов на децилитр (мг/дл) или 0,05 грамма на литр (г/л) гемоглобина.
Нормальные диапазоны значений могут незначительно отличаться в разных лабораториях. Некоторые лаборатории используют различные измерения или могут испытать различные образцы. Поговорите с вашим лечащим врачом о значении ваших конкретных результатов тестирования.
Что Означают Аномальные Результаты
Более высокий, чем обычно, уровень может указывать:
Рискует
Существует небольшой риск, связанный с тем, чтобы ваша кровь была взята. Вены и артерии различаются по размеру от одного человека к другому и от одной стороны тела к другой. Получение образца крови от одних людей может быть более сложным, чем от других.
Другие риски, связанные с наличием взятой крови, незначительны, но могут включать:
Референсные интервалы содержания свободного гемоглобина при исследовании гемоглобинцианидным методом на биохимическом автоматическом анализаторе ILAB 300 PLUS
Полный текст
Аннотация
Цель – установить референсные интервалы содержания свободного гемоглобина при исследовании его гемоглобинцианидным методом на биохимическом автоматическом анализаторе.
Материал и методы. Референсная группа была сформирована следующим образом: 120 здоровых мужчин и 120 здоровых женщин, проживающих в Астраханской области, в возрасте от 20 до 60 лет.
Контроль качества определения свободного гемоглобина обес-печивали стандартизацией преаналитического долабораторного, преаналитического лабораторного, аналитического и постаналитических этапов.
Забор крови осуществляли пункцией кубитальной вены после наложения жгута (не более 1 минуты) в положении пациента лежа в двухкомпонентные системы для забора крови – одноразовые полипропиленовые пробирки с активатором свертывания крови (Sarstedt, Германия). Для получения сыворотки крови пробирки с кровью центрифугировали при 2500 оборотах в минуту в течение 10 минут.
Свободный гемоглобин в сыворотке крови определяли гемоглобинцианидным методом на автоматическом биохимическом анализаторе ILAB 300 PLUS (Laboratory Instrumentation, USA).
Все статистические процедуры выполняли с помощью программного пакета Statistica 6.0 for Windows (StatSoft Inc., USA).
Результаты. В работе использовали классический подход с применением строгих критериев включения и исключения, рекомендованных CLSI C 28-A3. Гендерных и возрастных различий в содержании свободного гемоглобина в сыворотке крови у мужчин и женщин Астраханской области не обнаружено. Референсный интервал свободного гемоглобина составил у мужчин и женщин Астраханской области 0,02–0,84 г/л.
Ключевые слова
Полный текст
ИК – искусственное кровообращение; РИ – референсный интервал; АД – артериальное давление; ЧСС – частота сердечных сокращений; ЧДД – частота дыхательных движений.
ВВЕДЕНИЕ
Ежегодно в мире выполняется около 800 тысяч операций на сердце в условиях искусственного кровообращения (ИК). ИК – метод, позволяющий поддерживать кровоток в организме (отдельном органе) непродолжительное время за счет полной замены насосной функции сердца и газообменной функции легких. Несмотря на развитие современной перфузиологии, анестезиологии и реанимации, кардиохирургии, ИК является фактором внутрисосудистого гемолиза.
Диагностика внутрисосудистого гемолиза осуществляется с помощью определения лабораторного показателя – свободного гемоглобина (внеэритроцитарного) в сыворотке/плазме крови.
Оценка результатов лабораторного исследования проводится с помощью сопоставления полученных результатов с референсным интервалом (РИ) аналита. РИ имеет границы (верхний и нижний предел). Значения лабораторных показателей, выходящие за пределы РИ, указывают на развитие патологических процессов.
В настоящее время в клинической практике для диагностики внутрисосудистого гемолиза и оценки эффективности проводимого лечения используются справочные РИ свободного гемоглобина, установленные в 80–90 годы прошлого века. РИ свободного гемоглобина, указанные в справочной литературе, имеют различия в верхних пределах: 0–0,51 г/л и 0–0,26 г/л [1, 2].
Международные и отечественные сообщества по клинической лабораторной диагностике рекомендуют рассчитывать и устанавливать собственные РИ для своей аналитической системы (анализатор, реактивы и т.д.) и популяции [3, 4, 5, 6].
Ввиду значительных различий в РИ, указанных в справочной литературе, и значимости свободного гемоглобина в клинической практике для диагностики внутрисосудистого гемолиза у больных после операций на сердце, мы поставили перед собой цель установить РИ свободного гемоглобина у взрослого населения Астраханской области.
Установить РИ (референсные интервалы) содержания свободного гемоглобина при исследовании его гемоглобинцианидным методом на биохимическом автоматическом анализаторе.
МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
В работе использовался классический подход со строгими критериями включения и исключения, рекомендованными CLSI C 28-A3 [8]. Критерий включения в исследование – практически здоровые лица. Критерий исключения – наличие соматической патологии.
Обследования проводили в рамках профилактического медицинского осмотра в ФГБУ «Федеральный центр сердечно-сосудистой хирургии» Минздрава России (Астрахань). Все участники исследования дали свое информированное согласие.
При осмотре врачом-профпатологом – среднее систолическое АД составило 120,33 ± 0,64 мм рт. ст., диастолическое – 76,66 ± 0,37 мм рт. ст., ЧСС – 70,96 ± 3,54 в мин, ЧДД – 15,72 ± 2,34 в мин.
Среднее содержание общего холестерина в сыворотке крови составило 4,65 ± 0,46 ммоль/л, глюкозы – 5,25 ± 0,48 ммоль/л, общего билирубина – 8,58 ± 1,04 ммоль/л, эритроцитов в периферической крови 4,4 ± 0,1*109/л и гемоглобина 127,0 ± 1,4 г/л.
Референсная группа была сформирована следующим образом: 120 здоровых мужчин и 120 здоровых женщин, проживающих в Астраханской области, в возрасте от 20 до 60 лет.
Контроль качества определения свободного гемоглобина обеспечивали стандартизацией преаналитического долабораторного, преаналитического лабораторного, аналитического и постаналитических этапов.
Забор крови осуществляли пункцией кубитальной вены после наложения жгута (не более 1 минуты) в положении пациента лежа в двухкомпонентные системы для забора крови – одноразовые полипропиленовые пробирки с активатором свертывания крови (Sarstedt, Германия). Для получения сыворотки крови пробирки с кровью центрифугировали при 2500 оборотах в минуту в течение 10 минут.
Свободный гемоглобин в сыворотке крови определяли гемоглобинцианидным методом [2] на автоматическом биохимическом анализаторе ILAB 300 PLUS (Laboratory Instrumentation, USA).
Все статистические процедуры выполняли с помощью программного пакета Statistica 6.0 for Windows (StatSoft Inc., USA). Вычисляли X – среднее арифметическое и SD (стандартное отклонение). Тип распределения определяли по критерию Колмогорова – Смирнова. Для оценки различий средних тенденций между группами использовали t-критерий Стьюдента. Разделение считали статистически значимым при p 1
РИ, представленный в справочной литературе 2
0,02–0,84
0–0,26
0–0,46
Примечание: 1 Тонкошкурова О.А. с соавторами (1996) [2];
2 Левина Л.Д. с соавторами (1995) [2].
Таблица 2. Референсный интервал свободного гемоглобина (г/л) у здоровых мужчин и женщин, установленный нами и представленный в справочной литературе
Table 2. Reference interval of free hemoglobin (g/l) in healthy men and women: measured and represented in literature
Из представленных данных в таблице видно, что рассчитанная нами верхняя граница РИ свободного гемоглобина в 3,23 раза больше значений, установленных Тонкошкуровой О.А. с соавторами (1996) [2] и 1,83 раза больше значений, установленных Левиной Л.Д. с соавторами (1995) [2].
Полученные нами данные РИ подтверждаются результатами других авторов [1, 7], изучавших причины и частоту развития внутрисосудистого гемолиза у больных ишемической болезнью сердца после коронарного шунтирования в условиях ИК. Чумакова С.П. с авторами (2018) показали, что значения свободного гемоглобина в сыворотке крови доноров находятся в диапазоне от 0 до 1,0 г/л, повышение концентрации свободного гемоглобина в крови более 1 г/л у больных после операций на сердце в условиях ИК указывает на развитие внутрисосудистого гемолиза [7].
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
На сегодняшний день ведется работа по разработке и внедрению в клиническую практику наименее травматичных аппаратов для ИК. Несмотря на это, частота развития внутрисосудистого гемолиза у больных ишемической болезнью сердца в среднем составляет около 50% [7]. Опасность внутрисосудистого гемолиза заключается в том, что он усугубляет течение после-операционного периода, приводит к развитию почечной патологии, которая в отдельных случаях может стать причиной летального исхода.
Поэтому своевременная, точная и правильная лабораторная диагностика внутрисосудистого гемолиза востребована в настоящее время. Однако в лабораторной практике используются ручные методики для определения свободного гемоглобина [2], описанные в 80-е годы прошлого века, и РИ к ним.
На сегодняшний день клинические лаборатории оснащены современными высоковоспроизводимыми автоматическими анализаторами (аналитическими системами) с программами внутрилабораторного контроля качества, позволяющими оценить качество химической реакции, правильность и воспроизводимость лабораторных исследований. Автоматический биохимический анализатор ILAB 300 PLUS позволяет установить РИ свободного гемоглобина при применении гемоглобинцианидного метода.
Согласно отечественным и международным рекомендациям по лабораторной диагностике (по формированию референсных групп и расчету РИ), мы установили РИ свободного гемоглобина у мужчин и женщин Астраханской области. РИ свободного гемоглобина составил 0,02–0,84 г/л.
Установленный нами РИ свободного гемоглобина может быть использован в клинико-диагностических лабораториях Астраханской области, так как он был рассчитан с учетом рекомендаций по формированию референсной группы и стандартизации этапов проведения лабораторных исследований.
Определение свободного гемоглобина плазмы (гаптоглобин) в сыворотке крови в Санкт-Петербурге
Описание анализа
Гаптоглобин является одним из основных элементов, который связывает гемоглобин в крови. Его основная функция – предотвращение любых видов повреждений почечных канальцев и сохранение необходимого уровня железа в крови благодаря исключению экскреции гемоглобина.
Лабораторный анализ на концентрацию гаптоглобина позволяет обнаружить в организме острые воспалительные процессы, нефротические изменения, генетические отклонения, появление злокачественных опухолей или начинающийся некроз тканей – уровень белка может как снижаться, так и увеличиваться. Этот белок относится к острофазным элементам, но изменения его показателей не настолько закономерны, как у других белков. Исследование проводится с использованием сыворотки крови методом иммунотурбидиметрии.
Показания к проведению
Анализ применяется в случае:
контроля за процедурой переливания крови пациенту;
необходимости диагностики гемолитического состояния больного.
Факторы, влияющие на результаты анализа
Точность лабораторного анализа может быть нарушена из-за проведенного гемолиза, хилеза пробы, употребления андрогенов или кортикостероидов во время медикаментозной терапии.
Врач, назначающий исследование
Направление на анализ можно получить у неонатолога, педиатра, терапевта, онколога, гематолога, ревматолога.
Подготовка к анализу
Забор материала у пациента производится исключительно натощак, прием еды перед исследованием следует ограничить – ничего жареного, жирного, никакого алкоголя за 8 часов до процедуры. С утра при необходимости можно выпить воды. Прием лекарственных препаратов нежелателен на время забора крови, но в особых ситуациях следует в точности указать дозировку и количество употребляемых лекарств.
Нежелательно совмещать проведение анализа и другие диагностические процедуры – флюорографию, ректальный осмотр, физиотерапию, УЗИ-диагностику.
Интерпретация результатов
После получения на руки окончательных результатов лабораторных анализов обязательно проконсультируйтесь с профильным врачом. Не занимайтесь самодиагностикой, показатели могут немного отличаться в зависимости от использованного оборудования в лаборатории. Референсные значения нормального уровня гаптоглобина в крови:
Свободный гемоглобин в крови методика определения
Дозировка гемоглобина имеет первостепенное значение для оценки эритроцитного раздела, поскольку представляет собой функциональный элемент. Учитывая тот факт, что гемоглобин в чистом состоянии получается весьма трудно, и как таковой не подлежит дозировке, в текущей практике применяются косвенные методы дозировки.
Среди многочисленных существующих способов наиболее простым и точным методом гемоглобинометрии считается фотометрическое определение в виде цианметгемоглобина, а для эталонирования фотометров — использование стандартных растворов цианметгемоглобина, приготовленных из человеческого гемоглобина.
Принципы определения гемоглобина в крови. Железосинеродистый калий окисляет железистое железо гемоглобина, в результате чего все виды гемоглобина крови преобразуются в метгемоглобин. Последний комбинируется с цианистым калием, образуя цианметгемоглобин или циангемоглобин — наиболее устойчивое производное гемоглобина.
Состав используемого реагента следующий (по van Kampen-Zijlstra):
— Железосинеродистый калий [K3Fe(CN)6] 0,2 г
— Цианистый калий (KGN) 0,05 г
— Монокалиевый фосфат (КН2РО4) 0,14 г
— Дистилированная вода до 1000 мл
Показатель водорода реагента должен укладываться в пределы от 7,2 до 7,5, быть прозрачным и очень стойким. После приготовления раствор пропускается через качественный бумажный фильтр и хранится в герметически закрытых баллонах коричневого цвета, в холодильнике при температуре +4°. Хранить не более 1—2 месяцев. Периодически проверять чистоту раствора, в случае необходимости повторно фильтровать.
Раствор нетоксичен, поскольку концентрация цианистого калия значительно меньше ядовитой дозы.
Техника определения гемоглобина в крови. Влить 0,02 мл крови (содержащийся в одной пипетке гемоглобин) в пробирку с 5 мл реагента, перемешать и отставить на 20 мин. Прочет результата делать с помощью фотометра с фильтром S53 в ванночке, величиной 1 см, по сравнению с дистилированной водой.
Концентрация гемоглобина (в г/100 мл крови) определяется по формуле: Гемоглобин в г/100 мл = экстикция пробы х К(стандартная концентрация гемоглобина/стандартная экстинкция).
Калибровка фотометров осуществляется с помощью стандартного раствора гемоглобина, который у нас в стране поставляется бухарестским гематологическим Центром. Способ простой, точный, погрешность минимальная (±2%), воспроизводимость удовлетворительная.
Нормальные значения колеблятся в зависимости от возраста, пола высоты над уровнем моря.
У взрослого: мужчин = 15 ± 2 г/100 мл, а женщин = = 13 ± 2 г/100 мл.
У детей от двухлетнего возраста до половозрелости значения растут прогрессивно от 11 до 13 г/100 мл.
Редактор: Искандер Милевски. Дата обновления публикации: 18.3.2021
Гемоглобин
Гемоглобин – металлопротеин, белок, содержащий гем. Гемоглобин составляет около 98% белков, содержащихся в цитоплазме эритроцита. Основная функция гемоглобина – перенос кислорода.
Структура гемоглобина определяет способность переноса кислорода эритроцитами. К 4–6 месяцам жизни ребенка происходит замена фетального гемоглобина на взрослую форму. В норме в крови взрослого человека фетальный гемоглобин составляет не более 1%. Фетальный гемоглобин обладает повышенным сродством к кислороду и сниженным ответом на регулятор передачи кислорода к тканям, 2,3 дифосфоглицерат. Поэтому увеличенное содержание фетального гемоглобина у взрослого человека приводит к недостаточному поступлению кислорода к тканям, т. е. гипоксии.
Изменение структуры гемоглобина (гемоглобинопатии) приводит к нарушению связывания с кислородом, необратимому связыванию гемоглобина с углекислым газом и, последовательно, изменению формы эритроцитов от двояковогнутого эластичного диска до искаженных жестких структур.
Кроме оценки форм и концентрации гемоглобина представляет интерес определение фракций гемоглобина, связанного не только с кислородом, но и другими газами.
Способность крови (эритроцитов) транспортировать кислород к тканям за счет формирования оксигемоглобина может существенно снижаться при вдыхании продуктов горения углерода, серы, ингаляцией оксидом азота которые вступают в необратимое соединение с гемоглобином, образуя дисгемоглобины, и препятствуя формированию оксигемоглобина. В нормальных условиях кислородпереносящая фракция гемоглобина, О2-Hb составляет 95–99%. В этой фракции гемоглобин находится в обратимой связи с кислородом, в окисленном состоянии Fe2+. Небольшой процент (до 1–2%) восстановленного гемоглобина +H+Hb всегда присутствует в крови. Его количество резко возрастает при гемолизе эритроцитов.
В патологических фракциях дисгемоглобинов (метгемоглобин, сульфгемоглобин, карбоксигемоглобин) железо гемоглобина переходит в более окисленную форму (Fe3+), не способную связывать и переносить кислород. В нормальных условиях фракция дисгемоглобинов составляет не более 1,5% общего гемоглобина. Причиной значительного повышения фракции карбоксигемоглобина (до 10%) является курение.
В развернутом клиническом анализе крови может встречаться показатель среднего содержания гемоглобина в эритроците (MCH и MCHC).
Метод исследования
Определение формы гемоглобина и выявление гемоглобинопатий возможно с помощью электрофореза.
Определение концентрации гемоглобина (общий гемоглобин, tHb) выполняется различными методами. Принцип определения гемоглобина заключается в лизисе эритроцитов пробы и последующей обработке реактивом, дающим окраску в комплексе с гемоглобином. Референтным методом определения гемоглобина является гемоглобинцианидный.
Интерпретация результатов исследования
При оценке уровня гемоглобина следует помнить: